Основана на материалах из фондов Переславского музея–заповедника и посвящена быту и культуре города–крепости Переяславль в XII – XVII вв.

В экспозиции представлены материалы, полученные в результате раскопок Института археологии РАН последних лет. Массовое погребение, содержащее останки более 80 жителей средневекового города, обнаружено в ходе спасательных археологических работ на территории кремля Переславля–Залесского в 2016 г. В экспозиции представлены скульптурные портреты жителей города конца XIII – XIV в. Реконструкция облика по черепу выполнена сотрудником Лаборатории антропологической реконструкции Института этнологии и антропологии РАН Анной Рассказовой.

После завершения реставрационных работ выставлен уникальный комплекс предметов восточного стекла, найденный при исследовании переславского кремля в 2013 г. (реставратор – Екатерина Шаркова, ВХНРЦ им. академика И.Э. Грабаря; атрибуция Инны Кузиной, ИА РАН). Центральное место в экспозиции заняли предметы, обнаруженные археологами при исследовании Спасо-Преображенского собора, в том числе гробница князя Ивана Дмитриевича (находка 1939 г.; реставратор – Дмитрий Котов, ВХНРЦ им. академика И.Э. Грабаря) и печать константинопольского патриарха Афанасия I (находка 2014 г.; атрибуция Петра Гайдукова и Николая Макарова, ИА РАН).

Второй зал экспозиции посвящен периоду позднего Средневековья и отражает вопросы рядового участия Переяславля в становлении и развитии русской государственности, угасании старой и зарождении новой правящей династии. В этот период Переяславль являлся одним из городов Замосковного края. Благодаря духовной политике московских государей, он приобрел славу духовного центра. Оказавшись в гуще событий Смутного времени, город сохранил и свой воинский статус. Среди экспонатов – рукописные и печатные книги из библиотек переславских монастырей, жалованные грамоты царя Ивана IV и патриарха Иова, предметы художественного серебра, монетные находки (в том числе клады Смутного времени), доспехи и предметы вооружения.

Экспозиционный ряд дополнен археологическими находками. Волосник из Переславля–Залесского принадлежал женщине, имевшей высокий социальный статус (все ранее находимые волосники принадлежали женщинам царского дома, княжеских или знатных боярских семей). Головной убор обнаружен в результате исследования средневекового некрополя экспедицией Института археологии РАН. Сохранился в виде двух фрагментов – очелья (ободка) и ажурного верха (тульи). В результате музейной реставрации создан макет головного убора из х/б тюля, на котором закреплены подлинные фрагменты ткани (реставратор – Софья Мартьянова, ГосНИИР; атрибуция Ирины Елкиной, ИА РАН).